等度淋洗還是梯度淋洗

本篇從離子色譜等度淋洗與梯度淋洗的區(qū)別、優(yōu)勢(shì)、操作難易、譜圖分析等角度介紹兩種淋洗模式，用真實(shí)的分析數(shù)據(jù)說話，閱讀的時(shí)候帶著這兩個(gè)問題思考：為什么要選擇梯度淋洗？梯度會(huì)讓操作更麻煩嗎？

我們以陰離子分析為例做具體說明，離子色譜分析陰離子時(shí)常采用氫氧根淋洗液或碳酸根/碳酸氫根淋洗液，

等度淋洗是在分析過程中淋洗液組成和濃度都不變，手動(dòng)配置淋洗液時(shí)只需要配制一種，只需要一個(gè)高壓泵即可完成，儀器管路簡(jiǎn)單，能滿足大部分分析需求。但對(duì)某些樣品存在難以解決的問題，例如同時(shí)分離強(qiáng)弱保留組分共存的樣品，使用低濃度淋洗液，強(qiáng)保留組分洗脫時(shí)間很長(zhǎng)甚至不能被洗脫，若提高淋洗液濃度將強(qiáng)保留組分快速洗出，則很大可能會(huì)影響或干擾弱保留組分的分離；這個(gè)合適的“度”并不好掌握，于是梯度淋洗應(yīng)運(yùn)而生。

梯度淋洗可以設(shè)置梯度程序，最常使用的是濃度梯度，即在不同時(shí)間設(shè)置不同的淋洗液濃度。在起始階段選擇較低的淋洗液濃度，將弱保留組分洗脫后即可升至高濃度，將強(qiáng)保留組分快速洗出，實(shí)現(xiàn)強(qiáng)弱保留組分的同時(shí)分析。應(yīng)用范圍更廣，縮短分析時(shí)間。

梯度曲線以紅色虛線表示，根據(jù)譜圖可知，梯度淋洗在起始濃度使用10mM氫氧化鉀淋洗液，10-30min濃度線性增加到30mM，30-40min維持30mM的濃度，在最后階段回到起始濃度10mM。不但大大縮短了磷酸根的洗脫時(shí)間，峰形也變得更尖銳對(duì)稱。并且將弱保留的組分的分離度提高。

不同樣品選擇合適的梯度程序可以改善分離條件，提高分離度，減少分析時(shí)間，提高分析效率。在離子色譜中保留時(shí)間越長(zhǎng)，峰形越寬，因此使用梯度淋洗能保持峰形的尖銳，提高峰的對(duì)稱性有利于定量分析。因此有更高的分析需求，復(fù)雜的分析樣品或需要摸索最佳分離條件的用戶，在等度淋洗無法解決的情況下，配備淋洗液發(fā)生器使用氫氧根梯度淋洗將是不二之選，先進(jìn)的淋洗模式將助力科研的速度。

實(shí)現(xiàn)梯度淋洗的最簡(jiǎn)單方法是使用淋洗液發(fā)生器，儀器上方的淋洗液瓶只加入脫氣之后的超純水；

為說明實(shí)際使用梯度淋洗的難易。以青島睿譜INTELLIC工作站的濃度梯度設(shè)置界面為例：在左側(cè)梯度程序設(shè)置中用鼠標(biāo)任意建立和修改相應(yīng)梯度程序（支持20行），在右側(cè)會(huì)實(shí)時(shí)根據(jù)設(shè)置的梯度程序生成更直觀的梯度曲線；并且在分析時(shí)的實(shí)時(shí)曲線中也可作為背景疊加顯示此梯度曲線。淋洗液信息一目了然，可根據(jù)譜圖表現(xiàn)對(duì)梯度曲線及時(shí)優(yōu)化。

只需用鼠標(biāo)點(diǎn)擊即可設(shè)置相應(yīng)的淋洗液濃度，在線產(chǎn)生純凈且濃度準(zhǔn)確的淋洗液。一方面省去了配制溶液的手動(dòng)步驟，自動(dòng)化程度大大增加。另一方面整個(gè)流程避免了使用化學(xué)試劑帶來的誤差和危害，使分析結(jié)果的重復(fù)性大大提高，實(shí)現(xiàn)了只使用水進(jìn)行分析的綠色化學(xué)。

下面是幾張?zhí)荻瘸绦驊?yīng)用的實(shí)際案例譜圖：

除了從這兩張譜圖中看出應(yīng)用的場(chǎng)景不同，細(xì)心的人還可能注意到第二張圖因淋洗液濃度變化而導(dǎo)致的基線漂移，那為什么第一張圖使用梯度濃度更高而基線漂移卻不那么明顯呢？

原因是梯度淋洗時(shí)開啟CR-TC并施加合適電流即可大大降低基線漂移和噪聲，并能使背景電導(dǎo)進(jìn)一步降低。下篇將詳細(xì)介紹CR-TC的原理與應(yīng)用。

淋洗液發(fā)生器實(shí)拍圖（未接CR-TC）

使用梯度淋洗的三要素：氫氧根體系的色譜柱、淋洗液發(fā)生器、自動(dòng)再生電解抑制器，在青島睿譜已經(jīng)實(shí)現(xiàn)國(guó)產(chǎn)化自主化，專注于提升離子色譜儀器性能；

青島睿譜分析儀器有限公司研發(fā)生產(chǎn)的淋洗液發(fā)生器將淋洗液罐、CR-TC、脫氣盒單獨(dú)設(shè)立一個(gè)機(jī)箱，與離子色譜儀主機(jī)搭配連接方便，可輕松實(shí)現(xiàn)氫氧根淋洗液的梯度淋洗，經(jīng)驗(yàn)證，搭配使用WLK-12A抑制器可有效抑制70mM氫氧根淋洗液而不發(fā)生明顯基線漂移。

知識(shí)拓展：氫氧根體系色譜柱與碳酸鹽體系色譜柱的區(qū)別

固定相：碳酸鹽體系色譜柱為烷基季銨鹽，對(duì)碳酸鹽的親和力較強(qiáng)，對(duì)氫氧根的親和力弱；相應(yīng)的氫氧根體系色譜柱使用對(duì)氫氧根親和力更高的固定相。

分離和檢測(cè)角度看氫氧根做淋洗離子的背景電導(dǎo)更低，噪聲更小，非常適合進(jìn)行痕量分析，還可使用高濃度淋洗液分離強(qiáng)保留組分。

而某些特定領(lǐng)域碳酸鹽也具有一定優(yōu)勢(shì)，如測(cè)定磷酸鹽；

現(xiàn)在您已經(jīng)對(duì)等度淋洗和梯度淋洗有了初步的了解，如果需要更深一步的了解梯度淋洗，請(qǐng)看下篇 梯度淋洗進(jìn)階篇——CR-TC（連續(xù)再生捕獲柱）